図 1. 新発見の PLC 酵素群を促す脂質セカンドメッセンジャーである．ホスホリパーゼ C（PLC）は生体膜主成分のグリセロリン脂質（図 1）を加水分解し，DG を産生する酵素である．既知の哺乳類 PLC はホスファチジルイノシトール（PI）（4,5）二リン酸（PIP2）のみを基質とする（PIP2-PLC と表記）．当該酵素は PI 代謝回転の一部として主に多価不飽和脂肪酸（PUFA）含有 DG を選択的に産生する．一方で，哺乳類中のDG の大部分は飽和脂肪酸（SFA）含有 DG（SFA-DG）である．SFA-DG を選択的に産生する PLC は半世紀以上前に活性が報告されている．しかし，今日に至るまでその責任酵素（遺伝子）は同定されていなかった．哺乳類中の DG の大部分は SFA-DG である．近年，SFA-DG の蓄積（未知の PLC の活性上昇）が種々の病態や生理機能（動脈硬化症，がん，免疫，II 型糖尿病等）と連関することが示唆されている．しかし，分子実体が不明のため，遺伝子を基盤とした研究が展開できず，SFA-DG 代謝の分子機構に不明点が多い．我々は，SFA-DG をリン酸化する DG kinase（DGK）δ isozyme（DGK δ）の相互作用タンパク質中から，生体膜主要成分のホスファチジルコリン（PC）およびホスファチジルエタノールアミン（PE）等を加水分解し SFA-DG を選択的に産生するタンパク質（遺伝子名：SAMD8，SMS-related protein, SMSr）を発見した 1, 2）．すなわち，PC 特異的 PLC（PC-PLC）および PE 特異的PLC（PE-PLC）活性を持ち，SFA-DG を選択的に産生する哺乳類 PLC を発見した．哺乳類 PC-PLC は活性発見後 70 年以上，PE-PLC は 35 年以上分子実体（遺伝子）が不明の「幻の酵素」であった．また，従来の哺乳類 PLC（ホスファチジルイノシトール (PI) (4,5) 二リン酸 (PIP2) 特異的 PLC: PIP2-PLC）は主にアラキドン酸 (20:4) などの多価不飽和脂肪酸含有 DG を選択的に産生することから（図 1 左），本酵素群は従来の PLC（PIP2-PLC）と異なる「SFA-DG シグナル伝達経路（脂質新大陸）」を形成する可能性がある（図 1 右）．そこで本研究では新奇 PLC の生理的意義の解明を目的とし，特に本年度は，SMSr の他に PC-PLCまたは PE-PLC 活性を有する酵素を探索・同定し（図 1，課題①），これに成功した場合，新発見のPLC の酵素学的性質を解析すること（図 1，課題②）に焦点をおいた．実験方法SMSr と最も配列類似性の高い，SMS isoform 1 および SMS isoform 2 をクローニングし，Twin-― 126 ―
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