次に，Alexa Fluor 647 共役型抗 -TDP-43 抗体を加えて，TDP-43 陰性 / 陽性の神経細胞核の分離を試みた．TDP-43 陰性神経核を回収できることは確認しているが，NeuN 陽性 TDP-43 陰性細胞集団の割合は，全細胞核の 0.5% 程度（図３）とごく少量であり，DNA メチル化状態の解析には適さないと考えた．そこで，snmCAT-seq 法の解析を主軸とし，そのドライ解析の段階で，核内のTARDBP 発現量により，TDP-43 の核からの喪失を推定することとした．現在は，snmCAT-seq のプロトコール樹立を進めている．現在までのところ，マウスの凍結脳組織を用いて，組織から良好な単一核を抽出する方法を確立し，抗 NeuN 抗体で染色し，FACS によるプレートソーティングを行うところまで確立した．図 3. ALS 患者脳からの TDP-43 陰性神経核の分離おわりに今後は，snmCAT-seq の全工程をマウス脳組織で確立し，ヒトの脳組織への応用，及び ALS 症例における解析を進めてく予定である．謝辞本研究遂行にあたり，ご指導頂きました新潟大学脳研究所 脳神経内科学分野 小野寺理教授およびメイヨークリニックフロリダ Leonard Petrucelli 教授，本研究にご支援頂きました，公益財団法人 中外創薬科学財団の関係者の皆様に深謝申し上げます．引用文献1. DOI: 10.1093/nar/gkw499，発表年 : 20162. DOI: 10.1016/j.nbd.2019.104534，発表年 : 20193. DOI: 10.1038/s42003-021-02621-0，発表年 : 20194. DOI: 10.1016/j.celrep.2019.04.003，発表年 : 20195. DOI: 10.1038/s41586-022-04424-7，発表年 : 20226. DOI: 10.1016/j.xgen.2022.100107，発表年 : 2022― 105 ―FACS による解析．DAPI 染色により，核を分離．次に核集団から，NeuN 抗体と TDP-43 抗体により，TDP-43 陰性神経細胞核と TDP-43 陽性神経細胞核を分離して，集積．
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